XSelect Peptide CSH C18 Method Validation Kit

2010年,沃特世推出了新型表面带电杂化颗粒(CSH™)技术,为杂化颗粒表面赋予少量正电荷。利用这一技术可以使用低离子强度的流动相(如0.1%甲酸体系)分析碱性化合物,而仍能获得卓越的峰形与载量。CSH技术还允许使用甲酸来替代TFA等离子对试剂,而仍保持带电分析物的良好峰形,对于质谱分析尤为有利。


ACQUITY UPLC CSH C18柱克服了大多数现代C18柱在低离子强度流动相条件下(如0.1%甲酸体系)因载量所导致的峰形差问题。因带有严格控制下的、低水平的正表面电荷,ACQUITY UPLC CSH C18柱为碱性化合物提供行业领先的峰形,而无需使用离子对试剂。



产品优势:

■在分离多肽和小分子蛋白(<10,000da)时,无论使用0.1%fa还是0.1%tfa,均可获得出色的峰形。<>

■在肽图、蛋白质组学或合成多肽分析与纯化等应用中,对所涉及的复杂肽样品均具有卓越的峰容量与样品载量。

■涵盖不同规格色谱柱:Nano柱、UPLC柱、XP柱、HPLC分析柱、OBD制备柱,满足从纳流分析到实验室级制备的各种需求。

■使用细胞色素C胰蛋白酶解物标准品、在0.1%甲酸流动相条件下,对色谱柱填料批次进行质量控制,确保对验证方法提供稳定一致的柱间重现性。




品名型号编号
XSelect Peptide CSH C18 Method  Validation Kit 130Å, 2.5 µm, 4.6 mm X 100 mm,  3/pkg 186006966
XSelect Peptide CSH C19 Method  Validation Kit 130Å, 2.5 µm, 2.1 mm X 100 mm,  3/pkg 186006945
XSelect Peptide CSH C20 Method  Validation Kit130Å,, 3.5 µm, 2.1 mm X 100 mm, 3/pkg 186006953
XSelect Peptide CSH C21 Method  Validation Kit130Å,, 3.5 µm, 4.6 mm X 150 mm, 3/pkg 186006959


使用杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究

经证实,肽在研究中是非常有用的治疗剂和标记物。通常,为了实  现这些用途,会通过制备型反相(RP)色谱对肽进行纯化。在大多数  情况下,纯化出来的肽必须具有高纯度。如果存在污染物,会干扰  生物分析的结果。如果活性药物成分中存在污染物,后果将会非常  严重。因此,需要较高的色谱分辨率来尽量减少与目标肽化学性质  非常接近的共洗脱杂质。此外,还需要色谱柱填料具有卓越的载样  量,确保实现最佳的通量和生产率。肽分离使用的流动相中通常包  含强离子对试剂,例如三氟乙酸(TFA)。但是,如果选用含有TFA的  流动相,需要进行额外的制备步骤。由于三氟乙酸盐(TFA盐)固有的  毒性,必须将其除去或置换1。最好使用毒性较低的反离子,尤如乙  酸盐。实际上,大部分肽药都是乙酸盐或含有乙酸的液体制剂2-3。  因此,尽可能用乙酸(HOAc)流动相替代TFA流动相,这种做法似乎更  有优势。之前曾有研究表明,在使用HOAc流动相和等度反相色谱后,TFA  溶液中的肽(例如粗制合成肽)4-5大部分转化为乙酸盐形式6。同时,  使用高浓度乙酸盐缓冲液通过简单的洗脱步骤进行梯度分离,可实  现更彻底的盐形式转化。7总之,使用HOAc流动相可简化纯化过程,  有利于通过更少的步骤获得所需肽和反离子。

本文研究了使用BEH C18和CSH™ C18色谱柱进行制备型肽分离的过程。  BEH C18是一种有机硅C18固定相,基于亚乙基桥杂化颗粒(BEH)技术,  并具有卓越的耐用性和pH稳定性。表面带电杂化颗粒(CSH) C18则是  BEH C18的升级产品,其表面被修饰在酸性条件下带有微弱正电荷。以  下数据证明了这两种固定相均适用于高上样量的肽分离,既可用于  TFA调节的流动相,也可用于HOAc调节的流动相。并且,在高上样量  下,BEH C18和CSH C18在使用经优化的HOAc流动相时获得的目标峰均  比使用0.1% TFA时更窄。

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